São Timóteo nasceu em Listra, na região da Licaônia, filho de mãe judia chamada Eunice e de pai grego. Foi educado desde a infância no conhecimento das Sagradas Escrituras por sua mãe e por sua avó Loide, mulheres de fé sincera, como recorda o próprio Paulo. Quando o Apóstolo passou por Listra em suas viagens missionárias, encontrou neste jovem discípulo um colaborador dócil e dedicado, e o associou à sua obra evangelizadora, tornando-se Timóteo como um filho espiritual para Paulo.
Fiel companheiro do Apóstolo, Timóteo o acompanhou em diversas missões, foi enviado em delicadas tarefas às comunidades cristãs e partilhou das fadigas e perseguições da pregação do Evangelho. Paulo lhe dirigiu duas Cartas Pastorais, repletas de afeto paternal e de sábias orientações sobre o governo da Igreja, a sã doutrina, a oração e a santidade de vida dos pastores e fiéis. Nessas epístolas, exorta o jovem discípulo a reavivar o dom de Deus recebido pela imposição das mãos, a combater o bom combate da fé e a guardar fielmente o depósito sagrado. A Tradição venera São Timóteo como bispo de Éfeso e mártir, e a Igreja o celebra junto a São Tito como exemplo de pastores fiéis, herdeiros do zelo apostólico de São Paulo.